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凝胶电泳仪/电泳仪/电泳槽百科

凝胶电泳仪/电泳仪/电泳槽
凝胶电泳仪/电泳仪/电泳槽 仪器简介 凝胶电泳是以凝胶(如聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶等)为支撑物的区带电泳。被科学工作者用于分离不同物理性质(如大小、形状、等电点等)的分子。凝胶电泳通常用于分析用途,但也可以作为制备技术,在采用某些方法(如质谱(MS)、聚合酶链式反应(PCR)、克隆技术、DNA测序或者免疫印迹)检测之前部分提纯分子。 技术特点 凝胶电泳技术操作简便快速,可以分辨用其它方法(如密度梯度离心法)所无法分离的DNA片段。当用低浓度的荧光嵌入染料溴化乙啶(Ethidiu...   详细内容>>

凝胶电泳仪/电泳仪/电泳槽



仪器简介


凝胶电泳是以凝胶(如聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶等)为支撑物的区带电泳。被科学工作者用于分离不同物理性质(如大小、形状、等电点等)的分子。凝胶电泳通常用于分析用途,但也可以作为制备技术,在采用某些方法(如质谱(MS)、聚合酶链式反应(PCR)、克隆技术、DNA测序或者免疫印迹)检测之前部分提纯分子。

技术特点


凝胶电泳技术操作简便快速,可以分辨用其它方法(如密度梯度离心法)所无法分离的DNA片段。当用低浓度的荧光嵌入染料溴化乙啶(Ethidium bromide, EB)染色,在紫外光下至少可以检出1-10ng的DNA条带,从而可以确定DNA片段在凝胶中的位置。此外,还可以从电泳后的凝胶中回收特定的DNA条带,用于以后的克隆技术操作。

琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳区别


琼脂糖凝胶分离DNA片度大小范围较广,不同浓度琼脂糖凝胶可分离长度从200bp至近50kb的DNA片段。琼脂糖通常用水平装置在强度和方向恒定的电场下电泳。聚丙烯酰胺分离小片段DNA(5-500bp)效果较好,其分辩力极高,甚至相差1bp的DNA片段就能分开。聚丙烯酰胺凝胶电泳很快,可容纳相对大量的DNA,但制备和操作比琼脂糖凝胶困难。聚丙烯酰胺凝胶采用垂直装置进行电泳。目前,一般实验室多用琼脂糖水平平板凝胶电泳装置进行DNA电泳。

琼脂糖凝胶电泳迁移速率决定因素


琼脂糖主要在DNA制备电泳中作为一种固体支持基质,其密度取决于琼脂糖的浓度。在电场中,在中性pH值下带负电荷的DNA向阳极迁移,其迁移速率由下列多种因素决定:

1、DNA的分子大小:

线状双链DNA分子在一定浓度琼脂糖凝胶中的迁移速率与DNA分子量对数成反比,分子越大则所受阻力越大,也越难于在凝胶孔隙中蠕行,因而迁移得越慢。

2、琼脂糖浓度

一个给定大小的线状DNA分子,其迁移速度在不同浓度的琼脂糖凝胶中各不相同。DNA电泳迁移率的对数与凝胶浓度成线性关系。凝胶浓度的选择取决于DNA分子的大小。分离小于0.5kb的DNA片段所需胶浓度是1.2-1.5%,分离大于10kb的DNA分子所需胶浓度为0.3-0.7%,DNA片段大小间于两者之间则所需胶浓度为0.8-1.0%。

3、DNA分子的构象

DNA分子处于不同构象时,它在电场中移动距离不仅和分子量有关,还和它本身构象有关。相同分子量的线状、开环和超螺旋DNA在琼脂糖凝胶中移动速度是不一样的,超螺旋DNA移动最快,而开环双链DNA移动最慢。如在电泳鉴定质粒纯度时发现凝胶上有数条DNA带难以确定是质粒DNA不同构象引起还是因为含有其他DNA引起时,可从琼脂糖凝胶上将DNA带逐个回收,用同一种限制性内切酶分别水解,然后电泳,如在凝胶上出现相同的DNA图谱,则为同一种DNA。

4、电源电压

在低电压时,线状DNA片段的迁移速率与所加电压成正比。但是随着电场强度的增加,不同分子量的DNA片段的迁移率将以不同的幅度增长,片段越大,因场强升高引起的迁移率升高幅度也越大,因此电压增加,琼脂糖凝胶的有效分离范围将缩小。要使大于2kb的DNA片段有效分离所加电压不得超过5V/cm。

5、嵌入染料的存在

荧光染料溴化乙啶用于检测琼脂糖凝胶中的DNA,染料会嵌入到堆积的碱基对之间并拉长线状和带缺口的环状DNA,使其刚性更强,还会使线状DNA迁移率降低15%。

6、离子强度影响

电泳缓冲液的组成及其离子强度影响DNA的电泳迁移率。在没有离子存在时(如误用蒸馏水配制凝胶),电导率最小,DNA几乎不移动,在高离子强度的缓冲液中(如误加10×电泳缓冲液),则电导很高并明显产热,严重时会引起凝胶熔化或DNA变性。对于天然的双链DNA,常用的几种电泳缓冲液有TAE[含EDTA(pH8.0)和Tris-乙酸],TBE(Tris-硼酸和EDTA),TPE(Tris-磷酸和EDTA),一般配制成浓缩母液,储于室温。
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凝胶电泳仪/电泳仪/电泳槽

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    英国Cleaver 彗星实验箱

    英国Cleaver 彗星实验箱

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    英国Cleaver 变性梯度凝胶电泳系统

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    蛋白质双向电泳系统(等电聚焦与第二维电泳)-CSL-IEF-KIT-MAXIPLUS(英国Cleaver)

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    小型垂直电泳槽—Omnipage Mini—英国Cleaver

    小型垂直电泳槽—Omnipage Mini—英国Cleaver

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    水平凝胶电泳系统—Horizontal Gel—(英国Cleaver)

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    一体式核酸电泳-runVIEW(英国Cleaver)

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    电转印大型垂直电泳仪—VS20 WAVETETRAD1CBS—(英国Cleaver)

    电转印大型垂直电泳仪—VS20 WAVETETRAD1CBS—(英国Cleaver)

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    大型高分辨率垂直电泳系统—CSQ33—(英国Cleaver)

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    六一 DYY-12型 电脑三恒多用电泳仪电源

    六一 DYY-12型 电脑三恒多用电泳仪电源

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    六一 DYCZ-20A型 DNA序列分析电泳仪

    六一 DYCZ-20A型 DNA序列分析电泳仪

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      水平电泳槽   Hini20

    水平电泳槽 Hini20

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    托摩根生物科技有限公司
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     电泳仪   HV3000

    电泳仪 HV3000

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    实时检测电泳仪 RunGel

    实时检测电泳仪 RunGel

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    全自动核酸蛋白分析系统-毛细管电泳仪

    全自动核酸蛋白分析系统-毛细管电泳仪

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    Qsep1生物片段分析仪

    Qsep1生物片段分析仪

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    Gelfree 8100 微量蛋白质制备系统(多通道凝胶洗脱液相组分截留电泳)

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    MiniGel II 迷你电泳仪

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    等电聚焦系统-IEF100(Hoefer IEF100)

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    水平电泳槽_H15(Scie-Plas H15)

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    双板你垂直电泳-TV100(Scie-Plas TV100)

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    脉冲场电泳

    脉冲场电泳

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    奥盛 Mini-ES2 水平迷你电泳仪

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    CEInfinite全柱成像等电聚焦毛细管电泳系统

    CEInfinite全柱成像等电聚焦毛细管电泳系统

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    默隆(上海)实业有限公司
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    GE Ettan IPGphor 3双向电泳系统第一向等电聚焦系统

    GE Ettan IPGphor 3双向电泳系统第一向等电聚焦系统

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    品牌:通用电气医疗 型号:11-0033-64 产地:瑞典
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  26. 比一比
    GE Amersham™ ECL™ Gel system 预制胶水平蛋白电泳系统

    GE Amersham™ ECL™ Gel system 预制胶水平蛋白电泳系统

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    品牌:通用电气医疗 型号:GE Amersham™ E 产地:瑞典
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    SelectBioProducts垂直电泳系统

    SelectBioProducts垂直电泳系统

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    品牌:Select BioProducts 型号:垂直电泳系统 产地:美国
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    制备电泳

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    品牌:ATTO 型号:AE-6760 产地:日本
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    AE-6500垂直电泳槽

    AE-6500垂直电泳槽

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    品牌:ATTO 型号:AE-6687 产地:日本
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2017/5/26 15:54:31
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